第四章动物检疫技术.ppt

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文档介绍

⑶动物接种 ⑵动物组织培养 在病毒分离培养中广泛采用的是细胞培养技术。 单层细胞培养使细胞在器皿的表面生长出一层或数层细胞,常用于病毒的分离繁殖。 悬浮细胞培养是把细胞悬浮在营养液中进行培养,这中方法可连续进行,因而用于疫苗生产。 二、病毒性传染病病原检查 (一)病毒分离培养 (样品处理、病毒分离培养) (二)病毒检查方法 1.包涵体检查 2.病毒培养性状观察 狂犬病、伪狂犬病、犬瘟热病毒病毒的包涵体。 3.病毒形态学观察 有直接电镜观察和免疫电镜技术。 4.病毒核酸检测 最常用的检测方法是聚合酶链式反应。 三、寄生虫病病原检查 (一)虫卵检查法 1.直接涂片镜检: 2.饱和盐水漂浮: 3.水洗沉淀 (二)虫体检查法 1.蠕虫虫体检查法 2.蜘蛛昆虫虫体检查法 3.原虫虫体检查法 四、PCR技术简介 (一)PCR技术的主要用途 聚合酶链式反应(PCR):将生物材料中微量的目的DNA片段在体外扩增上百万倍,从而获得大量特异性核酸。 目前,PCR技术已广泛应用于病原微生物的微量检测、突变基因筛选、法医学鉴定等与生命有关的各个领域。 在动物检疫中,它主要用于微量样品和不完整病原的检测,尤其适用于个体极小、难于观察且难于人工培养的病毒的检测。 过去用常规检测技术几天甚至几周才能完成的试验,用该技术几个小时便可完成,这使禽流感等疫病的病原检测技术获得突破。并且该技术操作的每一步都不需要活的病毒,不会造成病原对环境的污染,对防疫有重大意义。 (二)PCR技术的原理 1.PCR反应基本成分 2.反应原理 (三)PCR技术的基本步骤 (四)特异性核酸的检出 第六节 免疫学检查技术 一、血清学检测技术 血清学检测技术是建立在抗原体特异性反应基础之上的。利用抗原抗体中已知的任何一方去检测未知的另一方,以达到检疫目的。 (一)凝集试验 颗粒性抗原(如红细胞、细菌等)与含有抗体的血清混合,在有电解

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