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羔三蓄煮j黧峰三z…跚t.-aⅢ, 。。。 基因对药物转运体的影响 靳桂英 杨 青 (复旦大学生命科学学院生物化学系 上海200433) 【摘要】 目的 cancer 研究鞘磷脂合酶2(sphingomyelinsynthase2,sMS2)缺损对人结肠癌细胞(coloncell,caco2) 中药物转运体P_糖蛋白(P_glycoprotein,P_gp)及多药耐药相关蛋白2(multidrugresistance_associatedprotein2, MRP2)的表达与功能的影响。方法sMs2特异性siRNA转染至caco 2细胞。采用RT_PcR和reahimePcR检 测sMs2特异性siRNA的干扰效率;采用westem blot法检测siRNA转染后P_gp和MRP2蛋白表达的变化;采用 胞内蓄积试验,通过HPLc检测P_gp及MRP2专一性底物罗丹明123及普伐他汀的蓄积含量,分析下调sMs2水 平对caco 2细胞中P_gp及MRP2功能的影响。结果 应用siRNA下调sMs2水平后,P_gp和MRP2的蛋白质水 平均显著下调;胞内蓄积实验结果显示罗丹明123及普伐他汀的蓄积量明显增加,说明P_gp和MRP2的外排功能 减弱。结论sA侣2基因表达下调对caco 2细胞中P_gp和MRP2的表达以及功能均有显著影响。 【关键词】siRNA干扰;鞘磷脂合酶2(sMs2); P糖蛋白(Pgp);多药耐药相关蛋白2(MRP2) 【中图分类号】 Q241 【文献标志码】 A doi:10.3969/j.issn2014.05.001 Effectsofsphingomyelinsynthase2(SMS2)interefered by siRNAon inCaco一2cells drugtransporters YA , q 隗 n蒌|肚 战 抛 ∞砘舭站 删 .嘴