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离心技术的应用by 王岱东 蒋康 林垸斌 杨扬 张最1.离心现象向心力：使质点作曲线运动时所需的指向曲率中心的力离心现象：当外力无法提供足够大的向心力时，质点的行为称为离心现象离心技术：利用电机高速旋转产生离心力场，根据不同物质之间密度、形状、大小等方面的差异，对悬浮液中混合的不同颗粒或乳浊液中密度不同且互不相溶的液体进行分离和提取的技术。其中使用到的仪器称为离心机。1.离心技术按转速：按目的：Stoke’s定律：V=d^2（ρ-ρ0）g/18ηRCF=mω2r/mg=(2π·rps) 2r/g2. 分析型超速离心化合物吸附薄层色谱吸附柱层析通透层析气-液色谱离子交换色谱电泳超速离心氨基酸++--+++++++-多肽++-+-++++-蛋白质--+++-+++++++嘌呤/嘧啶+++++++-核酸+-++-+++++单糖/二塘+++-++++-寡/多聚糖-++++++脂肪酸+++-++磷脂+++(类)固醇++++2. 分析型超速离心判定大分子纯度沉降常数测定分子量测定检测大分子中构象变化3.1 差速离心法概念：根据颗粒大小和密度不同造成沉降速度(即沉降系数)的差异，通过分级提高离心转速或高速与低速离心交替进行．使具有不同质量的颗粒样品(或大分子)从混合液中分批沉降至管底，从而实现分离目的。适用于：混合样品中各沉降系数差别较大的组分之间的分离，更准确地说是沉降系数差别在l至几个数量级的混合样品的分离，差别越大，分离效果越好。3.1 差速离心法检出量脓性标本(75)非脓血穿刺(63)甩片33经差速离心后4915提高血细胞涂片细菌检出率，降低检菌：常规涂片易出现G+假阳性、G-假阴性。差速离心处理后涂片检出率更高。纯化病毒：差速离心法提纯禽脑脊髓炎病毒效果良好3.2 密度梯度离心法V颗粒沉降速度d颗粒直径ρ颗粒密度ρ0介质密度g加速度η介质粘度概念：用超离心机对小分子物质溶液，长