常用培养基的制备技术及应用.docx

实验一

一实验目的要求

1．掌握培养基的概念和分类。

2．掌握常用培养基制备的一般程序。

3．熟悉常用培养基的制备技术和用途。

二实验原理

培养基（ culture medium）是根据微生物生长繁殖所需要的一定比例的营养物质（碳源、氮源等）、氢离子浓度（ pH 值）以及渗透压等条件，用人工方法制成的无菌营养基质。主要用于微生物分离培养、生化鉴定和保存菌种等。

培养基按物理性状不同可分为固体、半固体和液体培养基；按性质和用途不同又可细分为基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基和特殊培养基。根据物理性状和用途等不同常将培养基分装于试管或平皿等容器中。

常用培养基制备的一般程序是：

调配成分 溶解 较正 pH 值 过滤 分装 灭菌 质量检验 保存。配制

培养基时可以按照培养基配方调配各种基本成分，也可购买半成品的商品培养基干粉制剂直接配制。

三器材与试剂

１．试剂普通营养琼脂干粉、脱纤维羊血、半固体培养基、 SS培养基干粉、克氏双糖铁培养基干粉、 1 mol/L NaOH溶液、麦康凯培养基成分（蛋白胨、氯化钠、胆盐、乳糖、 5 g/L 中性红水溶液、琼脂粉）、蒸馏水。

２．器材小型药物天平、药匙、称量纸、三角烧瓶、量筒、吸管、精密 pH 值试纸试管、硅胶塞、牛皮纸（或报纸）、棉线、玻璃棒、玻璃纸、无菌平

皿、高压蒸汽灭菌锅、微波炉等。

四步骤与方法

1 / 6

１．常用培养基制备的一般程序及方法

１）调配成分根据培养基配方或用法，准确计算、称量所需培养基各基本成分或干粉制剂，装于三角烧瓶中，加入定量蒸馏水充分混合。

２）溶解将盛有混合物的三角烧瓶置于沸水浴或流动蒸汽灭菌器中加热溶解，呈半透明状。