干货!小分子培养类器官方法分享.docx

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文档介绍

类器官培养(Organoids culture)是指利用成体干细胞或多能干细胞,通过体外三维(3D)培养,生成具有一定空间结构的组织类似物。在活性小分子、重组蛋白、培养基添加剂等物质作用下,培养得到具有某种特定器官或组织特征的微型结构,建立与体内的来源组织或器官高度相似的模型,并且能够长期稳定传代培养[1]。

▲类器官生成 类器官是源自人的模型,其组织和功能更接近于生理细胞的组成和行为。类器官具有更稳定的基因组,更适合于生物转染、大规模基因组筛选或高通量药物筛选。 另外,类器官可以从单个组织或细胞中产生,有助于精准诊断和治疗。与动物模型相比,类器官模型的操作更为简便,可用于研究疾病的发生和发展机制。因此,在器官发育、精准医疗、再生医学、药物筛选、基因编辑、疾病建模等领域,类器官模型具有广泛的应用前景。

小分子在类器官培养中的常见应用

近年来,随着技术的进步,研究人员不断改进类器官培养方法,包括利用小分子化合物、重组蛋白以及特殊培养基等。尤其是小分子化合物能够模拟细胞信号通路、促进细胞发育和增殖,在类器官培养中起到了重要的作用。

小陶收集了一些类器官培养方法中涉及到的常见小分子,大家一起来看看具体的应用方法吧~ 毛喉素(T2939)

腺苷酸环化酶激活剂,可以增加细胞内环磷酸腺苷(cAMP)的水平。Forskolin可以诱导多种类型细胞的分化并激活核受体PXR和FXR,具有血小板抗凝集和降压作用,与其他小分子联合使用时,可诱导成纤维细胞重编程为iPSCs。常用于神经元分化和肝脏、甲状腺、血管类器官的培养。

◆推荐使用浓度:10 μM[2] CHIR-99021 (T2310)

一种高选择性 GSK-3α/β抑制剂,也是一种有效的 Wnt/β-catenin 信号通路激活剂,此外,CHIR-99021能诱导细胞自噬(autophagy),还可以增强小鼠和人类胚胎干细胞的自我更新。

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