细胞内细胞因子流式细胞仪检测.doc
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细胞内细胞因子的流式细胞仪检测
细胞内细胞因子的流式细胞仪检测
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细胞内细胞因子的流式细胞仪检测
细胞内细胞因子的流式细胞仪检测
点击次数: 621 作者:佚名 发布于: 2008-07-24 15:51 转载请注明来自
根源: 51protocol
一、简介
跟着研究的进展,只是对细胞进行定量和活性的检测已不可以知足需要。在单细胞水平研究细胞因子
的表达能力对研究细胞因子在疾病中的作用愈来愈显的重要非常。当前检测单个细胞特定细胞因子的表达
手段包含: ELIspot 、原位杂交、免疫细胞化学、限制性稀释剖析(limiting dilution analysis
,LDA)
和单细胞 PCR,应用原位杂交技术和免疫组化方法察看细胞因子蛋白表达及
mRNA表达能够辨别 Th1 和 Th2
细胞,此方法可获取较强的细胞内信号,但此方法工作量大、主观性强,难以进行大样本检测,且人肉眼
辨别能力有很大的限制性,而
ELISPOT及单细胞 PCR技术,技术性强、劳动强度大,难以进行宽泛推行。
跟着多标记及胞内细胞因子标记流式细胞技术的出现,使对细胞内细胞因子的研究推向了一个新的阶段。
下边主要对胞内细胞因子流式细胞技术作以介绍。
初期细胞因子表达与细胞功能有关性研究是鉴于特定克隆 "> 克隆细胞的激活。只管研究应用 T 淋巴细胞克隆 "> )与 TH2( IL - 4,IL - 5,IL - 10),但这些研究很难外推,因为 T 细胞克隆 " 克隆证了然不一样细胞因子的合成,如 TH1( IL - 2, IFN- >克隆与体内 T 细胞功能有关性还未被揭露。
近来, Jung 与 Picker 采纳了 monensin 、 PMA等药物预孵,用 Brefeldin ( BFA)、 Monensin 阻断了