黄酮含量测定知识讲解.pdf

黄 酮 含 量 测 定 精品文档

一、 黄酮含量的测定方 法

1、样品的处理

取材料地上部分洗净，晾晒至表面无水分，置于干燥箱中， 80℃下

干燥至恒重，磨成粉末，过筛待用。

2、标准曲线的绘制

准确称取芦丁对照品 20mg，置于 100ml 容量瓶中，加体积分数 70%

乙醇溶解至刻度，摇匀得 0.2mg/ml 的对照品溶液。然后，分别吸取

0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、2.4ml ，分别置于 7 支试管中，加水补

齐至 2.4ml，分别加入 5%亚硝酸钠 0.4ml，摇匀，放置 6min 。再加

入 10%硝酸铝溶液 0.4ml ，摇匀，放置 6min 。加入 4.3%氢氧化钠溶

液 4ml ，然后分别加 2.2ml 水，摇匀，放置 15min。以空白试剂为参

比，用紫外分光光度计在 500nm波长处测定吸光度。

3、黄酮的提取（微波提取法）

准确称取干燥至横重的野生马齿苋粉末 3 份，每份 1g，分别置于锥

形瓶中，喷洒适量蒸馏水润湿，用中高火微波处理 90s 。加入一定

量体积分数为 70%的乙醇溶液，于 80℃恒温水浴加热提取 1.5h ，趁

热过滤，洗涤残渣，用 70%乙醇定容于 50ml 容量瓶中，摇匀，得黄

酮提取液。

4、黄酮含量的计算

吸取分别黄酮提取液 1ml，加 1.4ml 蒸馏水，摇匀，加入 5%亚硝酸

钠 0.4ml ，摇匀，放置 6min。再加 10%硝酸铝溶液 0.4ml ，摇匀，放

置 6min。加入 4.3%氢氧化钠溶液 4ml。加入蒸馏水 2.8ml ，摇匀放 收集于网络，如有侵权请联系管理员删除 精品文档

置 15min。以蒸馏水代替黄酮提取液的空白试剂为参比，用紫外分

光光度计在 500nm波长出测定吸光度。带入标准曲线中，计算黄酮

含量。

总黄酮含量（ mg/g）= c*v/m