基因工幅程研究生11.ppt
- 133****9823个人认证 |
- 2020-11-30 发布|
- 4.59 MB|
- 173页
基因工程研究生11;;生物技术工程: 基因工程、蛋白质工程、酶工程、细胞工程等;第 一 部分DNA的重组DNA Recombination;DNA重组;发生在同源序列间的重组称为同源重组(homologous recombination),又称基本重组。是最基本的DNA重组方式,通过链的断裂和再连接,在两个DNA分子同源序列间进行单链或双链片段的交换。 ;Holliday模型中,同源重组主要4个关键步骤 ;片段重组体 (见模型图左边产物): 切开的链与原来断裂的是同一条链,重组体含有一段异源双链区,其两侧来自同一亲本DNA。; 内切酶 (recBCD);Holiday中间体;二、细菌的基因转移与重组;可接合质粒如 F 因子(F factor) ;(二)转化作用;例:溶菌时,裂解的DNA片段被另一细菌摄取。;;(三)转导作用;λ噬菌体的生活史;;;例(二)细菌的特异位点重组;hix为反向重复序列,它们之间的H片段可在Hin控制下进行特异位点重组(倒位)。H片段上有两个启动子P,其一驱动hin基因表达,另一正向时驱动H2和rH1基因表达,反向(倒位)时H2和rH1不表达。rH1为H1的阻遏蛋白基因。; H2鞭毛素;例(三)免疫球蛋白基因的重排;重链(IgH)基因的V-D-J重排和轻链(IgL)基因的V-J重排均发生在特异位点上。在V片段的下游,J片段的上游以及D片段的两侧均存在保守的重组信号序列(recombination signal sequence, RSS)。此重排的重组酶基因rag (recombination activating gene)共有两个,分别产生蛋白质RAG1和RAG2。 ;V片段;四、转座重组;插入序列(insertion sequences, IS)组成:
二个分离的反向重复(inverted repeats, IR)序列
特有的正向重复序列