心肌三项I(cTnICK-MBMYO) SOP完整版.doc

广州万孚生物技术股份有限公司 作业指导书 心肌三项I（cTnI/CK-MB/MYO） PAGE 6 1检验目的 测定血液样本中的心肌肌钙蛋白I（cTnI）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）和肌红蛋白（Myo）含量. 2检测原理 本试剂采用免疫荧光双抗体夹心法定量检测人全血、血清或者血浆中心肌肌蛋白I（cTnI）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）和肌红蛋白（MYO）的浓度。将待测样本加入缓冲液中混匀，样品中的待测物和缓冲液中的荧光标记抗体结合形成反应复合物。将混合样本滴加至试剂卡的加样孔中，在层析作用下，反应复合物沿着硝酸纤维素膜向前扩散，被固定在硝酸纤维素膜检测线上对应抗体所捕获。样本中的待测物越多，检测线上积聚的复合物越多，荧光抗体信号强度反应了被捕获的待测物数量。经广州万孚生物技术股份有限公司生产的免疫荧光检测仪，可检测出样本中待测物的浓度。检测仪默认的待测物检测结果以ng/ml为单位。 3标本准备 3.1全血、血浆及血清样本均可用于测试。 3.2全血收集：采用抗凝管采血，或在采血管里先加入抗凝剂（不建议使用EDTA以外的抗凝剂），将采集血样加入并摇匀备用。样本采集后应尽快使用，若采血后不能在2个小时内检测的，应放在2-8℃ 3.3血浆/血清收集：取血后应尽快分离血浆、血清，以免溶血。分离后的血浆、血清应尽快进行测试，如不能及时使用，应放在2-8℃保存，超过3天应加入0.1%硫柳汞防腐，置-20℃ 4检测试剂 4.1名称：心肌三项I（cTnI/CK-MB/MYO） 4.2代码：cTnI/CK-MB/MYO 4.3厂商：广州万孚生物技术股份有限公司 4.4组成： 试剂卡：心肌肌钙蛋白I单克隆抗体；肌酸激酶同工酶单克隆抗体；肌红蛋白单克隆抗体；鼠抗IgG多克隆抗体；硝酸纤维素膜、玻璃纤维、吸水纸、PVC板及其他试纸条支持物 缓冲液：磷酸盐缓冲液（PBS），内含表面活性剂及防腐剂 ID芯片、使用说明书及合格证。 4.5储存条件及有效期：缓冲液2?8℃保存，试剂卡4?30℃保存，不得冻存，有效期18个月。在室温保存可稳定14天。试剂卡 5检测仪器 飞测免疫荧光检测仪 6操作步骤 6.1准备： 6.1.1打开仪器左面的电源开关，仪器启动并加载检测系统，约30s后进入“万孚免疫荧光层析定量检测系统”初始界面，若需要使用快捷模式测试，选择“快捷测试”；若需使用标准模式测试，选择“标准测试”；随后仪器自检，提示自检成功后，点击“卡出”按钮。 6.1.2将试剂从储存环境中取出，并平衡至室温（25℃ 6.1.36.1.3从试剂盒中取出ID芯片，插入仪器的芯片端口。 注：同项目批次试剂，成功完成一次检测后，该项目批次的芯片数据已储存至仪器系统中，仪器能识别调用，该项目批次可不用插入ID芯片。 6.1.4撕开试剂卡铝箔袋，取出试剂卡。 6.2取样： 全血/血浆/血清样本:用移液器吸取75ul样本； 6.3混匀： 打开离心管盖，将样本加入缓冲液中，充分混匀1min。 6.4加样： 移液器加样：用移液器从上述溶液中吸取75ul加入到试剂卡的加样孔中。 6.5测试： 6.5.1“快捷测试”模式：试剂卡加样15min（配合计时器）后，立即将试剂卡插入仪器卡槽中中，点击“测试”按钮，系统将自动读卡并给出测试结果。 6.5.2“标准测试”模式：试剂卡加样时，即点击“测试”按钮，并在倒计时1min内将试剂卡插入仪器中，系统将继续倒计时，并自动读卡给出测试结果。 6.5.3点击“打印”按钮，系统将自动将测试结果打印在打印纸上。 6.6退卡： 将用过的试剂卡从仪器中取出，并和多余的缓冲液及移液器枪头按传染性物品进行处理。 7室内质控 采用免疫荧光检测仪和配套使用的心肌肌钙蛋白I定量检测试剂盒（免疫荧光法）检测质控品（未提供），重复测定后计算精密度CV?15%，相对偏差（Bias%）在?15%内，则该仪器与试剂性能符合要求。 8生物参考区间 正常参考值：cTnI<0.3ng/ml CK-MB<5ng/ml Myo<58ng/ml 建议各实验室根据实际情况，建立自己的参考范围 9检验结果的可报告区间 cTnI:0.1-50ng/ml CK-MB:0.3-100ng/ml Myo:2.0-400ng/ml 10.注意事项 10.1仪器使用注意事项 10.1.1除厂方提供的 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10.2试剂卡使用注意事项 10 10 10.2.3　 10.2.4　不同批号的试剂不能混用，ID 10.2.5试剂卡及其组件仅适用于万孚检测仪； 10.2.6切勿把表面被其它