食用菌育种教材 第2章 蕈菌的性及交配系统（4学时）.ppt

* 四极性异宗结合菌交配型分析的常规程序 从50个供试孢子中随机抽取3号（T1: AxBx或A1B1）T1×其余49个孢子 3, 5,…….12个 T1 从与T1亲和的孢子中随机抽取6号（T2: AyBy或A2B2）T2×其余36个孢子 6, 8,…….13个 T2 从既不与T1亲和，也不与T2亲和的孢子中，随机抽取9号（T3: AxBy或A1B2）T3 ×其余24个孢子 - 9, 11,……12个 T3+ 12, 14,…….13个 T4 T4: AyBx或A2B1） + + 二.核迁移在交配型分析中的应用（讲授） （一）核迁移及其检验方法 1.核迁移（ nuclear migration）：一个细胞核从自身菌丝细胞迁至另一个异核细胞，并在其中迅速移动的过程。 2.核移动 （nuclear movement）一个核在同种细胞内移动。 2.异核化的不同类型 （1）单程迁移：只有一种核单方向迁移过去，而对方的核不能相应迁来的核迁移。 （2）双程迁移：两种异核相互迁移的过程 异核化区域的大小、分布、稳定程度等均有所不同。 3.核迁移的检验方法 （1）形态学方法 检查锁状联合的有无 （2）遗传学方法 考察营养缺陷型菌株在基本培养基上的生长状况，能够生长者说明有野生型核移来。 Gly- Gly+ 4.核迁移速度 不同菌株，核迁移的速度不一样，一般在0.5-10mm/h。 核迁移速度与菌丝生长速度比较： 核迁移速度大于（远远大于）菌丝生长速度 温度 核迁移速度 菌丝生长速度 比值 长根鬼伞 白绒鬼伞 30 28 3.5 1.0 0.15 0.25 21.3 4.0 裂褶菌 22 33 0.5 3.0 0.13 0.22 3.8 13.6 5.核迁移发生的原因  （1）细胞质移动； （2）细胞质中正负粒子的作用； （3）B因子异质状态的作用 B因子影响?-1，6-葡聚糖酶的活性，?-1，6-葡聚糖酶能够降解大分子葡聚糖并使菌丝隔膜简单化，因此影响了细胞核在菌丝隔膜之间的移动。 桶孔隔膜 （二）核迁移在交配型分析中的应用 1.核迁移在交配型分析中的应用 在非标准型四极性菌的交配型分析中，如果需要知道产生“-”反应的3种类型中，哪一种属于A=B≠，哪一种属于A ≠ B = ，或者在标准四极性菌的交配型分析中某些反应不太典型，均可采用核迁移方法进行检验。 2.核迁移在交配型分析中应用的实际步骤 基本依据： A≠ B=，无核迁移发生 A=B≠ ，有核迁移发生 自一组不亲和的单核体的外侧，分别取一菌块与一种和近端单核体不亲和，与远端单核体可亲和的单核体进行第二次配对。 因为B因子控制核迁移，如果第二次配对可亲和，则有核迁移发生，第一次配对为A=B≠；第二次配对不亲和，则无核迁移发生，第一次配对为A≠B=。 核迁移方法 第二次配对产生锁状联合，表明相应的第一次配对有核迁移发生，其交配反应为A=B≠； 第二次配对无锁状联合产生，表明相应的第一次配对无核迁移发生，其交配反应为A≠B=。 不 亲 和 亲 和 不 亲 和 核迁移在交配型分析中的应用 已知 3×6 + 9×12 + 9 9 而3× - 6× - 12 12 综合上述核迁移实验结果，设3号菌株交配型为A1B1，则6号菌株交配型为A2B2，9号菌株交配型为A2B1，12号菌株交配型为A1B2 现从野外采集到一食用菌子实体，试测定其交配型系统并对其有性子代的交配型进行分析？ 3.交配型分析具体实例 技术路线与方法 子实体 单孢分离 随机配对 不亲和：亲和比测定 3：1 1：1 交配型分析 具体策略 各菌株单孢交配型归类 4种交配型(A1B1、A2B2、A1B2、A2B1) 二极性 四极性 2种交配型(A1、A2) 三.自然群体中不亲和因子数的估测（自学） 1.自然群体中不亲和因子数估测的意义 （1）提供遗传多样性的背景资料 （2）为鉴定一种食用菌的种质提供一个参考标准 。 2.不亲和因子数估测的基本程序 （1）在生态环境受到良好保护的区域尽可能广泛地收集待测菌的子实体，并用组织分离法获得其双核菌株。菌株总数最好能达50个以上。 （2）如果待测菌的交配系统类型不明