第八章 植物离体稳培育种.ppt

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文档介绍

植物离体培养在园艺植物育种中的应用 扩大变异范围 克服远缘杂交的一些障碍 获得体细胞杂种 倍性控制 突变的诱导和离体选择 加速亲本材料的纯化 快速无性繁殖 获得脱毒苗 种质资源的试管保存 可作为外源基因转化的受体系统 组织与器官培养 实验室 无菌操作室 培养室 化学实验室、洗涤消毒室和细胞学实验室 培养条件 步骤与方法 培养条件 培养基 无菌操作 培养的环境条件 培养基 种类 固体培养基 液体培养基 营养成分 配方:常用的有MS、ER、B5、SH、HE等。 配制 洗涤 母液的配制 配制步骤 营养成分 无机成分 大量元素:N、P、K、Ca、Mg、S等。 微量元素:Fe、Na、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I 等 有机成分 天然复合物:常用的有椰乳、酵母提取物、水解酪蛋白等,还有番茄汁、黄瓜汁、橙汁、马铃薯汁等。 植物生长调节剂 生长素:常用的有2,4 -D、NAA、IAA、IBA等 细胞分裂素:常用的有6-BA、KT、ZT等 赤霉素:GA3 有机成分 能量物质:常用2%~3%蔗糖 氨基酸:常用甘氨酸、半胱氨酸、丝氨酸、精氨酸、酪氨酸、谷氨酸、天冬酰胺等 维生素:常用Vc、VB1、VB6、生物素、烟酸、叶酸、肌醇等。 无菌操作 污染来源 培养基及玻璃器皿 无菌操作室、所用器械 外植体 材料的消毒 消毒剂的种类:Ca(Cl0)2、NaClO、H2O2、AgNO3、HgCl2、酒精等 消毒方法:材料修整——流水冲洗——药剂消毒(常用75%乙醇浸渍30s —— 0.1%升汞浸泡2~10min或2%~10% NaClO浸泡10~30min——无菌蒸馏水冲洗3~5次) 培养的环境条件 光照:白色荧光灯,光强1000~5000Lx,12~16hr,用自动定时器控制光照时间 温度:多为25±2℃ 湿度: 容器内湿度:100% 环境湿度:要求70%~80% 组织培养的步骤与方法 无菌培养的建立

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