基因工程与基因重组.pptx

基因重组与基因工程;生物工程定义;生物技术的四大体系; 重组DNA技术（recombinant DNA technique），又叫DNA克隆（DNA cloning）。在体外将各种来源的遗传物质——同源的或异源的、真核的或原核的、天然的或人工合成的DNA与载体DNA结合成一具有自我复制能力的DNA分子（复制子），继而通过转化或转染宿主细胞，筛选出含有目的基因的转化子细胞，再进行扩增，以获得该DNA分子的大量拷贝。这类克隆是在分子水平上操作，故又称分子克隆（molecular cloning）。; 由于DNA克隆研究对象常常是特异的基因片段，所以又称作基因克隆（gene cloning）。实现基因克隆所采用的方法及相关工作统称为基因工程（genetic engineering）。;1997年2月23日

英国 Wilmut; 从复杂的生物有机体基因组中，分离出目的基因片段。 用合适的酶切割目的基因和载体，产生匹配的末端 在体外，将目的基因片段连接到能自我复制的并且具有 选择标记的载体分子上，形成重组DNA分子。 将重组DNA分子转移到适当的受体细胞（亦称宿主细胞）， 并与之一起增殖。 筛选出获得了重组DNA分子的受体细胞克隆。从筛选出的阳性克隆中提取出扩增的目的基因片段，供进一步研究使用。;基因克隆的基本步骤;;酶切后的目的基因片段;;;;您已经掌握基因克隆的主要步骤！;（二）重组DNA中的工具酶;1. 限制性核酸内切酶（restriction endonuclease）;限制酶的命名 限制酶的命名是根据含有该酶的微生物种属而定。通常有三个斜体字母的缩写表示。

第一个大写字母取自细菌属名的第一个字母；

第二、三个小写字母取自微生物种名的头两个字母；

第四个字母代表该微生物同种内不同的株系；如果同一株名发现几种限制酶，则根据其被发现和分离的先后顺序，用罗马数字表示。