文档介绍
工艺过程: ①菌种培养 大肠杆菌37℃培养24h普通牛肉培养基; ②种子培养 16％玉米浆,接种量 1～ 1.5％,37℃,通气搅拌培养 4～8h; ③发酵罐培养 玉米浆培养基,接种量 8％,37℃通气搅拌培养 6～ 8h,离心分离发酵液,得菌体,加2倍量丙酮搅拌,压滤,滤饼过筛,自然风干成菌体干粉. * 2021/9/12 ④提取、沉淀、热处理 每千克菌体干粉加入0.01 mol/LpH8的硼酸缓冲液10L37℃搅拌1.5h,30℃8mol/L醋酸调节pH4.2～4.4,压滤,滤液加入2倍体积的丙酮,放置3～4h过滤,收集沉淀,自然风干,得干粗酶. 取粗制酶,加入0·3％甘氨酸,调节pH8.8搅拌1.5h离心,上清液60℃30min热处理。上清液加 2倍体积的丙酮,析出沉淀,离心,收集酶沉淀,0.01mol/L,pH8磷酸缓冲液溶解,离心得上清酶溶液. * 2021/9/12 ⑤精制、冻干 调节pH8.8离心弃去沉淀,清液再调 pH7.7加入50％聚乙二醇,浓度达到 16％。2～ 5℃放置 4～ 5天,离心得沉淀。蒸馏水溶解加 4倍量的丙酮沉淀,同法反复 1次,pH6.4,0.05mol/L磷酸缓冲液溶解,50％聚乙二醇处理 1次,即得无热原的 L一天门冬酸胺酶。溶于 0.8mol/L磷酸缓冲液,在无菌条件下用 6号垂熔漏斗过滤,分装,冷冻干燥制得注射用 L一天门冬酸胺酶成品,每I支 1万或 2万单位。 * 2021/9/12 2021/9/12 * 五、细胞色素C（Cytochrome C） 细胞色素:来自三羧酸循环中产生的琥珀酸辅酶A,其肽链仅有104个氨基酸,体内大量存在,一般无需外源补充;且外源补充与体内含量相比甚微。细胞色素C是生物氧化的一个非常重要的电子传递体,在线粒体崤上与其它氧化酶排列成呼吸链,参与细胞呼吸过程。 细胞色素C是中枢兴奋药,用于急救或辅助治疗