相衬显微镜基本介绍.pdf

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文档介绍

第一节 相衬显微镜 (Phase contrast microscope) 在光学显微镜的改进过程中,相衬显微镜的制造成功和普遍的应用,是近代显微镜技

术中的重要成就。在 1935 年荷兰学者泽尼克提出了相衬法原理,至 1941 年由德国蔡司工

厂诞生了世界上第一台相衬显微镜。 它的产生, 使人类的视觉在光学显微镜下又得到新的扩

展。从信息利用的角度来看, 人们将它视为光学信息处理概念下的第一个产品, 因而获得了

1953 年诺贝尔奖金。 我们知道,人眼只能在光波的波长(颜色)和振幅(亮度)有变化的情况下,才能在

显微镜下看到被检物体的存在, 但活的生物体多是无色透明的, 当光线通过时, 波长和振幅

变化不显著, 这样在明场镜检下就难于观察清晰。 为了克服这一困难, 可以采用一定的措施,

如物理、化学处理法、材料经固定、染色等过程,使被检物体的颜色及亮度发生变化,但这

只能观察已被杀死的材料,而不能观察到活体状态;当然,缩小聚光镜的孔径光阑,以增加

明暗反差的对比, 但这样不能充分发挥物镜数值孔径的性能, 细微结构仍难于被分辨, 同时

镜象亮度也随之降低;利用暗场、荧光或偏光镜检术,虽然能观察活体标本,但这些显微术

都是利用不同的光学原理, 达到特定的观察目的, 镜检效果局限在一定范围内。 可见上述措

施都不能得到满意的镜检效果, 而采用相衬显微术, 则能解决上述问题, 使无色透明活体标

本的细微结构在相衬显微镜下变得清晰可见。 一、相衬显微镜的特点 相衬显微镜是利用被检物体的光程(折射率与厚度之乘积)之差进行镜检的方法。也

即是有效地利用光的干涉现象, 将人眼不可分辨的相位差变为可分辨的振幅差, 即使是无色

透明的物质亦成为清晰可见, 这是普通显微镜难以达到的。 这不仅大为便利了活体材料的观

察,而且相衬显微术和

普通染色观察相结合,还可判断“膺象”和真实的图象。 相位和

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