文档介绍
限制性内切酶 1.特点:特异性,即识别特定核苷酸序列,在特定的切点切割. 2..分布：主要在微生物中。 3.结果：产生黏性末端（碱基互补配对）、平末端。 4.举例：大肠杆菌的一种限制酶（EcoRⅠ)能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开形成黏性末端，SmaⅠ能识别CCCGGG序列，并在C和G之间切割形成平末端 。 下页 要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性末端？ （二）基因操作的工具 要切两个切口，产生四个黏性末端。 如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？ 会产生相同的黏性末端，然后让两者的黏性末端黏合起来，就似乎可以合成重组的DNA分子了。 5、限制酶在原核生物中的作用是什么吗？ 原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵，限制酶是原核生物的一种防御性工具，当外源DNA侵入时，会利用限制酶将外源DNA切割掉，使之失效，达到保证自身的安全的目的。 7、作用结果：产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。 8、用同一种限制性酶处理不同DNA片段，会形成同样的黏性末端，可进行重组。 有关限制酶的知识小结 限制(性核酸内切)酶主要存在于微生物中,可切割连接在核苷酸之间的磷酸二酯键,形成DNA片段末端.切割后形成的黏性末端常常是反向对称重复排列的核苷酸. 一种限制酶只能识别特定的核苷酸序列, 用同一种限制性酶处理不同DNA片段，会形成同样的黏性末端，可进行重组。 “分子缝合针”——DNA连接酶 （二）基因操作的工具 DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，是把梯子两边扶手的断口连接起来，这样一个重组的DNA分子才能形成。 把切下来的DNA片段拼接成新的DNA，即将脱氧核糖和磷酸连接起来催化形成磷酸二酯键 DNA连接酶的作用 两DNA片段要具有互补的黏性末端才能拼起来 DNA连接酶的缝合作用 可把黏性末端之间的缝隙