基因工娜程制药.ppt

2017.12.12;第一节 概述

第二节 基因工程基本技术与策略

第三节 基因药物生产的基本过程

第四节 基因工程药物制造实例

;第一节 概述;一、基因工程建立的基础;2. DNA双螺旋结构和半保留复制机理的建立 ; 1966年，发现DNA连接酶。1970年Smith和Wilcox在流感嗜血杆菌中分离并纯化限制性内切酶 Hind Ш，使DNA分子的切割成为可能。1979年，Bltimore和Temin领导的两个研究小组分别在各自的工作中发现了逆转录酶。; 1972年，美国斯坦福大学Berg研究小组利用限制性内切酶EcoR I 和T4 DNA连接酶成功地进行了首例体外基因重组实验。;1973年，科恩（Cohen）等人用EcoR I内切酶处理大肠杆菌的抗四环素和抗青霉素及磺胺的质粒，并连接成一个新的重组质粒。将这种工程化的质粒转入大肠杆菌，在含有四环素和青霉素的平板中筛选重组菌落。

同年，加利福尼亚的博耶（Boyer）也进行了类似的实验。

重组子转化的成功标志着基因工程的诞生。 ; 基因工程（genetic engineering）是指在基因水平上，采用与工程设计十分类似的方法，按照人类的需要进行设计，然后按设计方案创建出具有某种新的性状的生物新品系，并能使之稳定地遗传给后代。 ;二、基因工程相关概念及基本工具;; 克隆和进行基因操作需要对遗传物质进行剪切、修饰和连接，这些过程都是在工具酶的催化下完成的。按功能将工具酶分类， 可分为剪切酶类、 连接酶类和修饰酶类

如下所示;1.限制性核酸内切酶 (restriction endonuclease, RE);与甲基化酶共同构成细菌的限制-修饰系统：限制外源DNA，保护自身DNA，稳定细菌遗传性状。;第一个字母取自产生该酶的细菌属名第一个字母，用大写；

第二、第三个字母是该细菌种名的前两个字母，用小写；

第四个字母代表菌株类型；