文档介绍
1.2 基因工程的基本操作程序 学习目标： 1、简述基因工程原理及基本操作程序。 2、记住目的基因导入受体细胞的方法。 3、理解目的基因检测与鉴定的方法 重点：基因工程基本操作程序的四个步骤， 难点：1、从基因文库中获取目的基因。 2、利用PCR技术扩增目的基因。 考点：基因工程原理及基本操作程序 三、基因工程的基本操作程序 1.目的基因的获取 （1）目的基因：编码蛋白质的______。 基因 1.目的基因的获取 （1）从基因文库中获取目的基因：如从基因 组文库或cDNA文库中获取。 （2）利用PCR技术扩增目的基因：利用DNA复 制的原理在体外特异性的复制某DNA片段以获 得呈指数方式增加的目的基因。 （3）人工合成法：通过DNA合成仪用化学方 法直接人工合成。 (3)PCR技术与DNA复制的比较 PCR技术 DNA复制 相同点 原理 DNA双链复制(碱基互补配对) 原料 四种游离的脱氧核苷酸 条件 模板、ATP、酶等 PCR技术 DNA复制 不同点 解旋 方式 DNA在高温下变性解旋 解旋酶催化 场所 体外复制 主要在细胞核内 酶 热稳定的DNA聚合酶(Taq酶) 细胞内含有的DNA聚合酶 结果 在短时间内形成大量的DNA片段 形成整个DNA分子 2.基因表达载体的构建——基因工程的核心 （1）由图可知载体的组成：_________、启动子、终止子、__________。 目的基因 标记基因 ①启动子、终止子:是基因转录的起点和终点，在转录过程中起调控作用。 ②标记基因:作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来,如抗生素抗性基因。 ③目的基因：能控制特定性状的外源基因。 （2）构建目的： ①使________ 在_________ 中稳定存在，并且可以遗传给下一代； ②使________ 能够表达和发挥作用。 目的基因 受体细胞 目的基