新紫外可见分光光度法-2015.ppt

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文档介绍

紫外可见分光光度法 与荧光分光光度法 药物研究所分析室 马辰 2015.3.27 紫外可见分光光度法 吸收光谱的来源 所有原子和分子均能吸收电磁波,其对吸收的波长有选择性。这种现象的产生主要是因为原子和分子的能量具有量子化特征 在正常状态下的原子或分子处于一定能级即基态,经光激发后,随激发光子能量的大小,其能级提高一级或数级,即分子由基态跃迁到激发态。 当以某一范围的光波连续照射分子或原子时,有些波长的光被吸收,产生被吸收谱线所组成的吸收光谱 分子的吸收光谱分为三类 转动:只涉及分子转动能级的改变,能级间距离很小,吸收光子的波长长,频率低。能级相差10-3~10-2kcal/mol,单纯的转动光谱发生在远红外区和微波区 振动:振动光谱反映分子转动和振动能级改变,引起这种改变的光子能量比第一种高,两个振动能级相距0.1~10kcal/mol,产生于波长较短,频率较高的近红外区,主要在1~30μ的波长区。 电子光谱:吸收光子后使电子跃迁,产生电子能级的改变,即为电子光谱。能量为20~300 kcal/mol。 电子光谱位于紫外区和可见区,其波长和能量的关系 波长(nm) 180 200 300 400 波数(cm-1) 55555 50000 30000 25000 能量 159 143 95 72 (kcal/mol) 紫外区与可见区 波长(nm) 真空紫外区 10~185 远紫外区 185~200 短紫外区 200~300 近紫外区 300~380 紫色 380~400 蓝色 400~500 绿色 500~580 黄色 580~600 橙色 600~620 红色 620~780 紫外吸收光谱反映分子吸收能量后所产生的电子跃迁,反映分子的电子结构特征,为物质结构的研究提供重要信息,分子的紫外光谱吸收带的波长和强度是化合物的常数之一。 由于仪器和操作方法的限制,紫外光谱只适合于

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