中国抗虫棉GFM Cry1A杀虫基因的合成及表达载体构建.pdf

维普资讯 http://www.cqvip.com 中国抗虫棉GFMCrylA杀虫基因的合成及表达载体构建 郭三堆 崔洪志 (中国农业科学院生物技术研究所 北京 100081)

提要 根据苏云金 芽胞杆菌杀 虫晶体蛋 白CrylA(b)和 上降低了杀虫蛋白的表达量 (Murrayeta1．1991)。因

CrylA(c)的氨基酸序列，采用植物偏爱密码子 ，人工合成 了全 此杀虫基因的设计中完全去除了PPSS序列及其相

长 1824bp的融合GFMCrylABt杀虫基因，并构建 了带有多 似序列。

个表达调控元件的该基 因高效植物表达戢体pGBI1214AB，以 CrylA可毒杀包括棉铃虫在内的鳞翅 目害虫，因

及该基因和修饰豇豆胰蛋白酶抑制剂(CpTI)基 因的双价杀虫 此根据 CrylA杀虫蛋 白质的氨基酸序列，进行杀虫

基因植物表达戢体pGBII214ABC。经在烟草中验证，这两种表 基因的设计。构成杀虫蛋白结构域 1的1～286氨基

达栽体在植物中可高效表达并赋予转基因烟草抗虫性。为我

国抗虫棉的研究打下了基础。 酸最大程度地保持了与CrylA(b)相一致，构成杀虫

关键词 杀虫基因 人工合成 表达栽体 抗虫植物 蛋 白结构域 2和 3的 287～608氨基酸则以Cry1A (c)为参照模板。这是因为前者被证明具有较好的细 虫害是危害农业生产的一个世界性问题。随着植 胞穿孔能力而后者与昆虫细胞膜的结合性较好。整个

物基因工程技术的发展，抗虫转基因农作物的研究取 基因合成的氨基酸模板是 608个氨基酸，基因编码区

得了很大进展。Perlak等人(1990)用植物优化密码 全长为 1824个碱基对。

子，人工改造了Bt杀虫基因，大幅度提高了Bt基因

在植物中的表达能力，使 Bt抗虫植物基因工程研究 2 BtGFM CrylA杀虫基因的人工合成